🧫 معرفی محیط کشت مولر هینتون آگار ایبرسکو کد i23118

محیط کشت مولر هینتون آگار ایبرسکو (Mueller Hinton Agar Ibresco) کد i23118 که با نام اختصاری MHA نیز شناخته می‌شود، یکی از مهم‌ترین و پرکاربردترین محیط‌های کشت در آزمایشگاه‌های میکروبیولوژی برای انجام آزمون حساسیت آنتی‌بیوتیکی یا آنتی‌بیوگرام (Antimicrobial Susceptibility Testing) است.

محیط کشت Mueller Hinton Agar یک محیط جامد، غیرانتخابی و غیر افتراقی است که به دلیل ترکیب غذایی مناسب، قابلیت رشد مطلوب بسیاری از باکتری‌های غیرسخت‌رشد (Non-fastidious Bacteria)، انتشار مناسب آنتی‌بیوتیک‌ها در بستر آگار و امکان استانداردسازی نتایج، به‌طور گسترده در روش دیسک دیفیوژن Kirby-Bauer مورد استفاده قرار می‌گیرد.

در آزمون آنتی‌بیوگرام، سوسپانسیون استانداردشده باکتری روی سطح محیط مولر هینتون آگار کشت داده شده و دیسک‌های حاوی آنتی‌بیوتیک روی محیط قرار می‌گیرند. پس از انکوباسیون، قطر هاله عدم رشد اطراف هر دیسک اندازه‌گیری شده و نتایج بر اساس استانداردها و جداول تفسیری معتبر مانند CLSI یا EUCAST ارزیابی می‌شوند.

ترکیبات محیط مولر هینتون آگار به‌گونه‌ای طراحی شده‌اند که رشد مناسب بسیاری از باکتری‌های مورد بررسی در آزمون حساسیت دارویی را فراهم کنند. وجود نشاسته در محیط به جذب برخی ترکیبات و متابولیت‌های سمی کمک می‌کند و ترکیبات پروتئینی محیط، مواد مغذی مورد نیاز برای رشد میکروارگانیسم‌ها را تأمین می‌کنند.

فرازمد محیط کشت مولر هینتون آگار ایبرسکو کد i23118 را برای آزمایشگاه‌های میکروبیولوژی، آزمایشگاه‌های تشخیص طبی، مراکز تحقیقاتی، دانشگاه‌ها و مجموعه‌های کنترل کیفیت عرضه می‌کند. برای خرید محیط کشت مولر هینتون آگار، استعلام قیمت محیط کشت MHA ایبرسکو و تهیه محیط کشت آنتی‌بیوگرام می‌توانید از طریق فرازمد اقدام کنید.

✅ ویژگی‌های محیط کشت مولر هینتون آگار ایبرسکو

✓ محصول برند ایبرسکو (Ibresco)

✓ کد محصول i23118

✓ شناخته‌شده با نام Mueller Hinton Agar و مخفف MHA

✓ محیط کشت استاندارد و پرکاربرد برای انجام آزمون حساسیت آنتی‌بیوتیکی

✓ مناسب برای روش دیسک دیفیوژن Kirby-Bauer

✓ قابل استفاده برای بررسی حساسیت یا مقاومت باکتری‌ها نسبت به عوامل ضد میکروبی

✓ محیط کشت غیرانتخابی (Non-selective Medium)

✓ محیط کشت غیر افتراقی (Non-differential Medium)

✓ مناسب برای رشد بسیاری از باکتری‌های غیرسخت‌رشد

✓ دارای قابلیت انتشار مناسب عوامل ضد میکروبی در بستر آگار

✓ مناسب برای اندازه‌گیری هاله عدم رشد (Zone of Inhibition)

✓ قابل استفاده در آزمایشگاه‌های میکروبیولوژی بالینی، تحقیقاتی و کنترل کیفیت

✓ عرضه به‌صورت پودر محیط کشت دهیدراته

🧪 ترکیبات محیط کشت مولر هینتون آگار

فرمولاسیون دقیق محصول باید مطابق دیتاشیت و برچسب همان لات از محیط کشت ایبرسکو بررسی شود. ترکیبات اصلی فرمولاسیون رایج Mueller Hinton Agar عبارت‌اند از:

pH نهایی رایج محیط در دمای 25 درجه سانتی‌گراد: حدود 7.3 تا 7.4 ± 0.2

📊 کاربرد محیط کشت مولر هینتون آگار

⚙️ اساس عملکرد محیط کشت Mueller Hinton Agar

عملکرد محیط کشت مولر هینتون آگار در آزمون آنتی‌بیوگرام بر اساس انتشار عامل ضد میکروبی در بستر آگار و ایجاد گرادیان غلظتی در اطراف دیسک است.

پس از تلقیح یکنواخت سوسپانسیون باکتریایی روی سطح محیط، دیسک‌های آنتی‌بیوتیکی قرار داده می‌شوند. ماده ضد میکروبی از دیسک به داخل آگار انتشار پیدا کرده و غلظت آن با افزایش فاصله از دیسک کاهش می‌یابد.

اگر میکروارگانیسم نسبت به آنتی‌بیوتیک مورد بررسی حساس باشد، در محدوده‌ای که غلظت دارو برای مهار رشد کافی است، رشد باکتری مشاهده نمی‌شود و هاله عدم رشد (Zone of Inhibition) تشکیل خواهد شد.

قطر هاله عدم رشد بر حسب میلی‌متر اندازه‌گیری می‌شود و نتیجه با استفاده از جداول تفسیری معتبر و متناسب با گونه باکتری، آنتی‌بیوتیک، مقدار ماده مؤثره دیسک و روش استاندارد آزمایش تفسیر می‌شود.

نکته مهم این است که بزرگ‌تر بودن هاله به‌تنهایی به معنای قوی‌تر بودن آنتی‌بیوتیک نیست و قطر هاله باید صرفاً بر اساس Breakpointهای استاندارد همان میکروارگانیسم و عامل ضد میکروبی تفسیر شود.

🧫 طریقه آماده‌سازی محیط کشت مولر هینتون آگار

توجه: مقدار دقیق پودر مصرفی و pH نهایی محصول ایبرسکو کد i23118 باید با دیتاشیت یا برچسب محصول تطبیق داده شود. روش زیر، روش رایج تهیه Mueller Hinton Agar با فرمول استاندارد 38 گرم در لیتر است.

مقدار 38 گرم پودر محیط کشت Mueller Hinton Agar را وزن کنید.

پودر را در یک لیتر آب مقطر یا دیونیزه سوسپانسیون کنید.

محیط را همراه با هم‌زدن حرارت دهید و تا جوشیدن ادامه دهید تا پودر و آگار کاملاً حل شوند.

محیط را در دمای 121 درجه سانتی‌گراد به مدت 15 دقیقه اتوکلاو کنید.

پس از استریلیزاسیون، محیط را خنک کرده و پیش از ریختن در پلیت به‌آرامی مخلوط کنید تا ترکیبات محیط یکنواخت باشند.

محیط را در شرایط آسپتیک داخل پلیت‌های استریل توزیع کنید.

اجازه دهید محیط روی یک سطح صاف کاملاً جامد شود.

پیش از انجام آزمون آنتی‌بیوگرام، کیفیت سطح آگار، عدم آلودگی، ضخامت مناسب محیط و شرایط نگهداری پلیت‌ها بررسی شود.

⚠️ نکات مهم در تهیه و استفاده از محیط MHA

✓ برای انجام آزمون دیسک دیفیوژن استاندارد، عمق محیط در پلیت باید حدود 4 میلی‌متر باشد.

✓ ضخیم‌تر بودن محیط می‌تواند موجب کاهش قطر هاله عدم رشد و نازک‌تر بودن آن موجب افزایش قطر هاله شود.

✓ سوسپانسیون باکتریایی باید مطابق روش استاندارد، معمولاً با کدورت معادل 0.5 McFarland تنظیم شود.

✓ تلقیح سطح محیط باید به‌صورت یکنواخت انجام شود تا رشد Confluent Lawn ایجاد شود.

✓ دیسک‌های آنتی‌بیوتیکی باید طبق زمان‌بندی روش استاندارد پس از تلقیح روی محیط قرار گیرند.

✓ فاصله مناسب بین دیسک‌ها باید رعایت شود تا از هم‌پوشانی هاله‌های عدم رشد جلوگیری شود.

✓ شرایط، دما، زمان و اتمسفر انکوباسیون باید بر اساس میکروارگانیسم و دستورالعمل جاری CLSI یا EUCAST انتخاب شوند.

✓ قطر هاله عدم رشد باید بر حسب میلی‌متر اندازه‌گیری شود.

✓ نتایج نباید صرفاً بر اساس بزرگی یا کوچکی هاله تفسیر شوند؛ استفاده از Breakpointهای معتبر الزامی است.

✓ کنترل pH، ضخامت آگار، کاتیون‌های دوظرفیتی، میزان تیمین و تیمیدین و کیفیت دیسک‌های آنتی‌بیوتیکی برای صحت نتایج آزمون حساسیت دارویی اهمیت دارند.

🔬 نحوه انجام آنتی‌بیوگرام روی محیط مولر هینتون آگار

🧬 کنترل کیفیت محیط کشت مولر هینتون آگار

کنترل کیفیت MHA باید بر اساس استاندارد مورد استفاده آزمایشگاه و دستورالعمل جاری انجام شود. سویه‌های متداول مورد استفاده برای کنترل کیفیت آزمون‌های حساسیت ضد میکروبی شامل موارد زیر هستند:

قبولی یا رد عملکرد محیط کشت نباید صرفاً بر اساس «رشد خوب» سویه‌های کنترل انجام شود. در آزمون حساسیت آنتی‌بیوتیکی، قطر هاله‌های عدم رشد برای ترکیب مشخصی از سویه کنترل و دیسک آنتی‌بیوتیکی باید در محدوده QC تعریف‌شده توسط استاندارد مورد استفاده قرار گیرد.

👁️ ظاهر محیط کشت

ظاهر رایج پودر دهیدراته: پودر همگن و روان با رنگ کرم تا زرد روشن.

ظاهر رایج محیط آماده‌شده: ژل شفاف تا کمی اپالسانس با رنگ کهربایی روشن.

ظاهر نهایی محصول ایبرسکو باید با مشخصات فیزیکی اعلام‌شده در دیتاشیت یا برچسب همان محصول تطبیق داده شود.

🌡️ شرایط نگهداری

پودر دهیدراته Mueller Hinton Agar باید مطابق شرایط درج‌شده روی بسته‌بندی و دیتاشیت محصول، در ظرف اصلی و کاملاً دربسته نگهداری شود.

از ورود رطوبت به ظرف، نگهداری در مجاورت منابع حرارتی و باز ماندن طولانی‌مدت درب محصول جلوگیری شود.

پلیت‌های آماده‌شده نیز باید مطابق دستورالعمل معتبر آزمایشگاه و مشخصات سازنده نگهداری شوند و پیش از مصرف از نظر آلودگی، دهیدراته شدن، ترک‌خوردگی، تغییر رنگ و سایر علائم افت کیفیت بررسی شوند.

📊 مقایسه Mueller Hinton Agar با محیط‌های کشت مشابه و مرتبط

❓ سوالات متداول محیط کشت مولر هینتون آگار

محیط کشت مولر هینتون آگار چیست؟

Mueller Hinton Agar یا MHA یک محیط کشت جامد، غیرانتخابی و غیر افتراقی است که بیشترین کاربرد آن انجام آزمون حساسیت آنتی‌بیوتیکی به روش دیسک دیفیوژن و Kirby-Bauer است.

چرا برای آنتی‌بیوگرام از محیط مولر هینتون آگار استفاده می‌شود؟

ترکیب غذایی مناسب، رشد مطلوب بسیاری از باکتری‌های غیرسخت‌رشد، قابلیت انتشار مناسب آنتی‌بیوتیک‌ها در آگار و امکان کنترل عوامل مؤثر بر نتایج آزمون باعث شده است Mueller Hinton Agar به محیط استاندارد و پرکاربرد برای آزمون Disk Diffusion تبدیل شود.

تفاوت MHA و MHB چیست؟

MHA یک محیط جامد حاوی آگار است و عمدتاً برای آزمون حساسیت آنتی‌بیوتیکی به روش دیسک دیفیوژن استفاده می‌شود. MHB یک محیط مایع است و در روش‌های Broth Dilution، تعیین MIC و برخی آزمون‌های حساسیت ضد میکروبی کاربرد دارد.

آیا می‌توان تمام باکتری‌ها را روی مولر هینتون آگار آنتی‌بیوگرام کرد؟

خیر. Mueller Hinton Agar معمولی عمدتاً برای باکتری‌هایی استفاده می‌شود که روش استاندارد AST برای آن‌ها تعریف شده است. برخی میکروارگانیسم‌های سخت‌رشد به محیط‌های اصلاح‌شده، مکمل‌ها و شرایط اختصاصی نیاز دارند.

ضخامت استاندارد محیط مولر هینتون آگار در پلیت چقدر است؟

در روش استاندارد دیسک دیفیوژن، عمق آگار حدود 4 میلی‌متر در نظر گرفته می‌شود. تغییر قابل توجه ضخامت محیط می‌تواند اندازه هاله‌های عدم رشد و نتیجه آزمون را تحت تأثیر قرار دهد.

کدورت استاندارد باکتری برای آنتی‌بیوگرام چقدر است؟

در روش رایج Kirby-Bauer، سوسپانسیون باکتریایی معمولاً با استاندارد 0.5 McFarland تنظیم می‌شود. روش دقیق تهیه و استفاده از تلقیح باید مطابق استاندارد جاری مورد استفاده آزمایشگاه انجام شود.

محیط کشت مولر هینتون آگار ایبرسکو را از کجا تهیه کنیم؟

برای خرید محیط کشت مولر هینتون آگار ایبرسکو کد i23118، استعلام قیمت MHA ایبرسکو و تهیه سایر محیط‌های کشت مورد استفاده در آزمایشگاه‌های میکروبیولوژی می‌توانید از طریق فرازمد اقدام کنید.