🧫 معرفی محیط کشت بلاد آگار بیس ایبرسکو کد i23020
محیط کشت بلاد آگار بیس ایبرسکو (Blood Agar Base Ibresco) کد i23020 یک محیط پایه مغذی و چندمنظوره است که برای تهیه محیط بلاد آگار، کشت و جداسازی میکروارگانیسمهای سخترشد و بررسی واکنشهای همولیز مورد استفاده قرار میگیرد.
این محصول بهصورت پودر دهیدراته عرضه میشود و پس از حلکردن، استریلیزاسیون و افزودن خون استریل دفیبرینه، محیط Blood Agar آماده میشود. افزودن خون، علاوه بر تأمین فاکتورهای رشد مورد نیاز باکتریهای سخترشد، امکان مشاهده و تفکیک الگوهای همولیز آلفا، بتا و گاما را فراهم میکند.
بلاد آگار یکی از پرکاربردترین محیطهای کشت در آزمایشگاههای میکروبیولوژی بالینی است و برای بررسی رشد، مورفولوژی کلنی و واکنش همولیتیک میکروارگانیسمهایی مانند Streptococcus، Staphylococcus، Listeria و برخی باکتریهای گرم منفی کاربرد دارد. خود پایه Blood Agar Base نیز بدون افزودن خون میتواند بهعنوان یک محیط عمومی مغذی برای رشد طیف وسیعی از میکروارگانیسمها استفاده شود.
فرازمد محیط کشت بلاد آگار بیس ایبرسکو کد i23020 را برای آزمایشگاههای تشخیص طبی، مراکز میکروبیولوژی، دانشگاهها، مراکز تحقیقاتی و مجموعههای کنترل کیفیت عرضه میکند. برای خرید محیط کشت بلاد آگار بیس، استعلام قیمت Blood Agar Base ایبرسکو و تهیه محیط کشت پایه بلاد آگار میتوانید از طریق فرازمد اقدام کنید.
✅ ویژگیهای محیط کشت Blood Agar Base ایبرسکو
✓ محصول برند ایبرسکو (Ibresco)
✓ کد محصول i23020
✓ محیط کشت پایه برای تهیه Blood Agar
✓ مناسب برای تهیه پلیتهای بلاد آگار و بلاد آگار حرارتدیده
✓ قابل استفاده برای کشت و جداسازی میکروارگانیسمهای سخترشد
✓ مناسب برای بررسی واکنشهای همولیز آلفا، بتا و گاما
✓ قابل استفاده بهعنوان محیط عمومی مغذی بدون افزودن خون
✓ مناسب برای بررسی Streptococcus، Staphylococcus و سایر باکتریهای بیماریزا
✓ قابل استفاده برای تهیه محیط شکلات آگار با حرارتدهی کنترلشده محیط حاوی خون
✓ مناسب برای آزمایشگاههای بالینی، آموزشی و تحقیقاتی
✓ دارای pH اسیدی ملایم برای ایجاد واکنش همولیز واضح
✓ عرضه بهصورت پودر همگن و دهیدراته
✓ منطبق با کاربردهای استاندارد APHA اعلامشده توسط سازنده.
🧪 ترکیبات محیط کشت بلاد آگار بیس
فرمولاسیون اختصاصی Blood Agar Base ایبرسکو کد i23020 در یک لیتر محیط به شرح زیر است:
| ترکیب | مقدار در یک لیتر | نقش در محیط کشت |
|---|---|---|
| Meat Peptone | 15 گرم | تأمین نیتروژن، اسیدهای آمینه و مواد مغذی ضروری |
| Heart Extract | 5 گرم | تأمین ویتامینها، مواد معدنی و فاکتورهای رشد |
| Sodium Chloride | 5 گرم | حفظ تعادل اسمزی محیط |
| Agar | 15 گرم | جامدکردن محیط کشت |
مجموع پودر موردنیاز: 40 گرم در یک لیتر
pH نهایی در دمای 25 درجه سانتیگراد: 6.8 ± 0.2
📊 کاربرد محیط کشت بلاد آگار بیس
| کاربرد | میکروارگانیسم یا گروه هدف | هدف استفاده |
|---|---|---|
| تهیه محیط Blood Agar | طیف وسیعی از باکتریها | ایجاد محیط غنیشده برای رشد و جداسازی |
| بررسی همولیز | Streptococcus spp. | افتراق واکنشهای آلفا، بتا و گاما |
| کشت باکتریهای سخترشد | Fastidious Microorganisms | تأمین مواد غذایی و فاکتورهای رشد |
| بررسی استافیلوکوکها | Staphylococcus spp. | ارزیابی رشد، رنگ کلنی و واکنش همولیتیک |
| بررسی پنوموکوک | Streptococcus pneumoniae | مشاهده کلنی و همولیز آلفا |
| بررسی لیستریا | Listeria spp. | مشاهده رشد و هاله باریک بتا همولیز |
| تهیه شکلات آگار | باکتریهای نیازمند محیط غنی | لیز گلبولهای قرمز و آزادسازی فاکتورهای رشد |
| کشت عمومی | باکتریهای غیرسخترشد | استفاده از پایه بدون خون بهعنوان محیط مغذی |
| آموزش میکروبیولوژی | سویههای آموزشی | بررسی مورفولوژی کلنی و انواع همولیز |
⚙️ اساس عملکرد محیط کشت Blood Agar Base
پپتون گوشت و عصاره قلب موجود در محیط، منابع غنی نیتروژن، اسیدهای آمینه، ویتامینها و سایر مواد ضروری برای رشد میکروارگانیسمها را فراهم میکنند. سدیم کلرید تعادل اسمزی محیط را حفظ کرده و آگار باعث ایجاد بستر جامد مناسب برای تشکیل و بررسی کلنیها میشود.
پس از افزودن خون دفیبرینه، محیط از یک پایه عمومی به یک محیط غنیشده و افتراقی تبدیل میشود. خون، فاکتورهای رشد مورد نیاز بسیاری از باکتریهای سخترشد را فراهم میکند و گلبولهای قرمز امکان آشکارسازی فعالیت همولیتیک میکروارگانیسمها را به وجود میآورند.
نوع خون مورد استفاده میتواند بر ظاهر و تفسیر همولیز اثر بگذارد. خون گوسفند برای بررسی استرپتوکوکهای گروه A مناسب است، اما برای برخی ارگانیسمها ممکن است خون اسب یا فرمولاسیون دیگری مورد نیاز باشد.
🔬 انواع همولیز روی محیط بلاد آگار
| نوع همولیز | ظاهر اطراف کلنی | تفسیر |
|---|---|---|
| آلفا همولیز | تغییر رنگ سبز یا قهوهای در اطراف کلنی | تخریب ناقص گلبولهای قرمز |
| بتا همولیز | ایجاد ناحیه کاملاً شفاف اطراف کلنی | تخریب کامل گلبولهای قرمز |
| گاما همولیز | بدون تغییر قابل مشاهده در محیط | عدم همولیز گلبولهای قرمز |
نمونههای رایج
| میکروارگانیسم | واکنش متداول روی بلاد آگار |
|---|---|
| Streptococcus pyogenes | بتا همولیز |
| Streptococcus pneumoniae | آلفا همولیز |
| Staphylococcus aureus | اغلب بتا همولیز؛ ممکن است به سویه وابسته باشد |
| Enterococcus faecalis | اغلب گاما یا آلفا همولیز |
| Listeria monocytogenes | هاله باریک بتا همولیز |
الگوی همولیز بهتنهایی برای شناسایی قطعی میکروارگانیسم کافی نیست و باید همراه با رنگآمیزی گرم، مورفولوژی کلنی و آزمونهای تکمیلی تفسیر شود.
🧫 طریقه آمادهسازی محیط کشت بلاد آگار بیس ایبرسکو
تهیه یک لیتر محیط Blood Agar
پیش از مصرف، ظرف حاوی پودر را بهآرامی تکان دهید تا پودر یکنواخت شود.
مقدار 40 گرم از پودر Blood Agar Base ایبرسکو را در یک لیتر آب مقطر سوسپانسیون کنید.
محیط را همراه با همزدن بهآرامی حرارت دهید تا پودر و آگار کاملاً حل شوند.
محیط را در دمای 121 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه اتوکلاو کنید.
پس از استریلیزاسیون، محیط را با سرعت مناسب تا دمای 45 تا 50 درجه سانتیگراد خنک کنید.
در شرایط آسپتیک، 5 درصد خون استریل دفیبرینه گوسفند به محیط اضافه کنید. صفحه رسمی ایبرسکو محدوده 4 تا 5 درصد را نیز ذکر کرده است، اما دیتاشیت فنی و کنترل کیفی محصول بر پایه 5 درصد خون تنظیم شدهاند.
محیط را بهآرامی و کاملاً مخلوط کنید تا خون بدون ایجاد کف یا حباب در محیط توزیع شود.
محیط را در شرایط آسپتیک داخل پلیتهای استریل بریزید.
اجازه دهید محیط روی سطح صاف جامد شود.
پیش از مصرف، پلیتها را از نظر آلودگی، تغییر رنگ، حباب، ترکخوردگی و یکنواختی سطح بررسی کنید.
⚠️ نکات مهم در آمادهسازی بلاد آگار
✓ خون را به محیط بسیار داغ اضافه نکنید؛ دمای بالا موجب لیز شدن گلبولهای قرمز و تبدیل محیط به حالت شکلات آگار میشود.
✓ دمای مناسب افزودن خون حدود 45 تا 50 درجه سانتیگراد است.
✓ از خون استریل، تازه و دفیبرینه استفاده شود.
✓ از تکاندادن شدید محیط پس از افزودن خون خودداری کنید.
✓ ایجاد کف یا حباب میتواند سطح پلیت را نامناسب و تفسیر همولیز را دشوار کند.
✓ رنگ محیط آمادهشده با خون گوسفند باید قرمز گیلاسی و محیط کدر باشد.
✓ حرارتدهی بیشازحد پایه میتواند کیفیت ژل و واکنشهای همولیز را مختل کند.
✓ نوع خون، کیفیت خون، pH پایه و شرایط انکوباسیون میتوانند بر ظاهر همولیز اثر بگذارند.
✓ پلیتهای خشکشده، آلوده یا دارای تغییر رنگ غیرطبیعی نباید استفاده شوند.
🍫 تهیه محیط شکلات آگار با استفاده از Blood Agar Base
محیط بلاد آگار بیس ایبرسکو قابلیت استفاده برای تهیه محیط شکلات آگار را نیز دارد.
پس از افزودن خون یا هموگلوبین به محیط پایه، محیط حاوی خون در حدود 80 درجه سانتیگراد به مدت تقریبی 10 دقیقه حرارت داده و مخلوط میشود تا گلبولهای قرمز لیز شوند و رنگ محیط به قهوهای شکلاتی تغییر کند. این فرایند مواد مغذی داخل گلبولهای قرمز را آزاد میکند.
بااینحال، برای تهیه استاندارد و تکرارپذیر Chocolate Agar، استفاده از فرمولاسیون اختصاصی Chocolate Agar Base ایبرسکو کد i23042 و مکملهای متناسب با میکروارگانیسم هدف میتواند انتخاب دقیقتری باشد.
🧬 کنترل کیفیت محیط کشت Blood Agar Base ایبرسکو
بر اساس گواهی آنالیز ایبرسکو، محیط پایه بدون خون و محیط حاوی 5 درصد خون دفیبرینه گوسفند پس از تلقیح در دمای 35 ± 2°C به مدت 18 تا 24 ساعت بررسی میشوند. استرپتوکوکها در اتمسفر حاوی 3 تا 5 درصد CO₂ انکوبه میشوند.
| سویه کنترل کیفی | شماره ATCC | رشد روی پایه ساده | رشد با خون گوسفند | واکنش همولیز |
|---|---|---|---|---|
| Escherichia coli | 25922 | خوب | خوب | بتا |
| Staphylococcus aureus | 25923 | خوب | خوب | بتا |
| Streptococcus pneumoniae | 6305 | خوب | خوب | آلفا |
| Candida albicans | 10231 | اعلام نشده | خوب | بدون همولیز |
| Pseudomonas aeruginosa | 27853 | خوب | خوب | در گواهی مشخص نشده |
👁️ ظاهر محیط کشت
ظاهر پودر دهیدراته: پودر همگن، روان و بژرنگ.
ظاهر محلول پایه پیش از افزودن خون: زرد تا قهوهای مایل به زرد، شفاف تا کمی کدر.
ظاهر محیط آمادهشده با 5 درصد خون گوسفند: قرمز گیلاسی و مات.
غلظت محلول پایه: 4 درصد.
pH نهایی در دمای 25 درجه سانتیگراد: 6.8 ± 0.2
🌡️ شرایط نگهداری
پودر دهیدراته Blood Agar Base ایبرسکو باید در ظرف اصلی و کاملاً دربسته، در محیط خشک و در دمای کمتر از 30 درجه سانتیگراد نگهداری شود.
محیط آمادهشده باید در دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد نگهداری شود. طبق صفحه محصول ایبرسکو، پلیتهای بلاد آگار آماده در شرایط مناسب یخچالی تا سه ماه قابل نگهداری اعلام شدهاند؛ بااینحال، مدت مصرف عملی باید بر اساس کنترل کیفیت داخلی آزمایشگاه، شرایط بستهبندی، آلودگی، خشکشدن سطح و دستورالعمل جاری مجموعه تعیین شود.
📊 مقایسه Blood Agar Base با محیطهای مشابه
| ویژگی | Blood Agar Base | Columbia Blood Agar Base | Chocolate Agar Base | Tryptic Soy Agar + Blood |
|---|---|---|---|---|
| نوع محیط | پایه مغذی و غنیشونده | پایه غنیتر برای بلاد آگار | پایه تهیه شکلات آگار | محیط عمومی قابل غنیسازی |
| کاربرد اصلی | کشت عمومی و بررسی همولیز | رشد بهتر باکتریهای سخترشد و بررسی همولیز | کشت باکتریهای سخترشد پس از لیز خون | کشت عمومی و بررسی برخی واکنشهای همولیتیک |
| نیاز به افزودن خون | برای تهیه Blood Agar بله | بله | بسته به روش تهیه | بله |
| بررسی همولیز | بله | بله | خیر | بله |
| مناسب برای Streptococcus | بله | بله؛ معمولاً بازیابی قویتر | بسته به گونه و مکمل | بله |
| مناسب برای Haemophilus | در حالت بلاد آگار معمولی محدود | در فرمول اصلاحشده و با خون مناسب | مناسبتر پس از غنیسازی | محدود |
| رنگ نهایی | قرمز | قرمز | قهوهای شکلاتی | قرمز |
| کاربرد شاخص | محیط عمومی بلاد آگار | محیط غنی برای نمونههای بالینی | رشد ارگانیسمهای نیازمند فاکتورهای آزادشده خون | محیط پایه عمومی |
❓ سوالات متداول محیط کشت بلاد آگار بیس
محیط کشت بلاد آگار بیس چیست؟
Blood Agar Base یک محیط کشت پایه و مغذی است که پس از افزودن خون استریل دفیبرینه به محیط Blood Agar تبدیل میشود و برای رشد باکتریها و بررسی واکنشهای همولیز کاربرد دارد.
چه مقدار خون به Blood Agar Base اضافه میشود؟
در فرمول استاندارد این محصول معمولاً 5 درصد خون استریل دفیبرینه گوسفند به محیط پایه خنکشده تا دمای 45 تا 50 درجه سانتیگراد اضافه میشود.
چرا خون باید در دمای 45 تا 50 درجه به محیط اضافه شود؟
اگر محیط بیش از حد داغ باشد، گلبولهای قرمز لیز شده و محیط به رنگ قهوهای و حالت شکلات آگار تبدیل میشود. اگر محیط بیشازحد سرد شود، آگار شروع به جامدشدن میکند و خون بهصورت یکنواخت مخلوط نخواهد شد.
تفاوت بلاد آگار و بلاد آگار بیس چیست؟
Blood Agar Base پودر پایهای است که هنوز خون ندارد. Blood Agar محیط آمادهشدهای است که با افزودن خون دفیبرینه به پایه استریل تهیه میشود.
تفاوت بلاد آگار و شکلات آگار چیست؟
در بلاد آگار، گلبولهای قرمز سالم باقی میمانند و امکان مشاهده همولیز وجود دارد. در شکلات آگار، گلبولها بر اثر حرارت لیز میشوند و فاکتورهای رشد آزاد میشوند؛ بنابراین امکان بررسی همولیز وجود ندارد.
آیا میتوان Blood Agar Base را بدون افزودن خون استفاده کرد؟
بله. پایه این محیط مغذی است و میتواند برای رشد عمومی برخی میکروارگانیسمها استفاده شود، اما برای بررسی همولیز و رشد بهتر باکتریهای سخترشد باید خون مناسب افزوده شود.
محیط کشت بلاد آگار بیس ایبرسکو را از کجا تهیه کنیم؟
برای خرید محیط کشت بلاد آگار بیس ایبرسکو کد i23020، استعلام قیمت Blood Agar Base و تهیه سایر محیطهای کشت میکروبی میتوانید از طریق فرازمد اقدام کنید.
