🧫 معرفی محیط کشت پلیت کانت آگار ایبرسکو کد i23144
محیط کشت پلیت کانت آگار ایبرسکو (Plate Count Agar Ibresco) کد i23144 که با نام اختصاری PCA نیز شناخته میشود، یک محیط کشت عمومی و غیرانتخابی برای شمارش میکروارگانیسمهای زنده و قابل کشت در نمونههای غذایی، لبنی، آب، خوراک دام و سایر نمونههای دارای اهمیت بهداشتی است.
این محیط با نامهای Standard Methods Agar، Tryptone Glucose Yeast Agar و Casein-Peptone Dextrose Yeast Agar نیز شناخته میشود و یکی از محیطهای رایج برای تعیین شمارش کلی باکتریهای هوازی مزوفیل، شمارش استاندارد پلیت و برآورد بار میکروبی نمونههاست.
فرمولاسیون متعادل محیط پلیت کانت آگار، مواد غذایی لازم برای رشد طیف وسیعی از باکتریهای غیرسخترشد را فراهم میکند. پپتون کازئین منبع نیتروژن، اسیدهای آمینه و پپتیدهاست؛ عصاره مخمر ویتامینها و فاکتورهای رشد را تأمین میکند و گلوکز منبع انرژی مورد نیاز رشد باکتریهاست.
محیط PCA فاقد عوامل مهارکننده و شاخصهای افتراقی است؛ بنابراین برای شناسایی اختصاصی یک میکروارگانیسم طراحی نشده و کاربرد اصلی آن شمارش تعداد کلنیهای قابل رشد و محاسبه CFU در نمونه است.
این محیط در روشهای استاندارد شمارش میکروبی، بهویژه روش Pour Plate، کاربرد گستردهای دارد و مطابق اطلاعات ایبرسکو با استانداردها و روشهای APHA، AOAC، ISO 4833 و ISO 17410 مرتبط است.
فرازمد محیط کشت پلیت کانت آگار ایبرسکو کد i23144 را برای آزمایشگاههای صنایع غذایی، لبنی، آب و فاضلاب، دامپزشکی، مراکز کنترل کیفیت، دانشگاهها و مراکز تحقیقاتی عرضه میکند. برای خرید محیط کشت PCA، استعلام قیمت Plate Count Agar ایبرسکو و تهیه محیط کشت شمارش میکروبی میتوانید از طریق فرازمد اقدام کنید.
✅ ویژگیهای محیط کشت Plate Count Agar ایبرسکو
✓ محصول برند ایبرسکو (Ibresco)
✓ کد محصول i23144
✓ شناختهشده با نام Plate Count Agar و مخفف PCA
✓ محیط کشت عمومی و غیرانتخابی
✓ مناسب برای شمارش کل میکروارگانیسمهای قابل کشت
✓ قابل استفاده برای شمارش باکتریهای هوازی مزوفیل
✓ مناسب برای روش Pour Plate
✓ قابل استفاده در بررسی بار میکروبی مواد غذایی
✓ مناسب برای شمارش میکروبی شیر و محصولات لبنی
✓ قابل استفاده برای بررسی آب و سایر نمونههای بهداشتی
✓ مناسب برای خوراک دام و نمونههای صنعتی
✓ فاقد عوامل مهارکننده و شاخص افتراقی
✓ دارای پپتون کازئین، عصاره مخمر و گلوکز
✓ مناسب برای محاسبه Colony Forming Unit یا CFU
✓ قابل استفاده در کنترل کیفیت مواد اولیه و محصولات نهایی
✓ عرضه بهصورت پودر دهیدراته همگن و روان
✓ مرتبط با روشهای استاندارد APHA، AOAC، ISO 4833 و ISO 17410.
🧪 ترکیبات محیط کشت پلیت کانت آگار
فرمولاسیون اختصاصی Plate Count Agar ایبرسکو کد i23144 در یک لیتر محیط به شرح زیر است:
| ترکیب | مقدار در یک لیتر | نقش در محیط کشت |
|---|---|---|
| Pancreatic Digest of Casein | 5 گرم | تأمین نیتروژن، اسیدهای آمینه، پپتیدها و مواد مغذی |
| Yeast Extract | 2.5 گرم | تأمین ویتامینهای گروه B و فاکتورهای رشد |
| Glucose | 1 گرم | منبع کربن و انرژی برای رشد میکروارگانیسمها |
| Agar | 14 گرم | عامل جامدکننده محیط کشت |
مجموع پودر موردنیاز: 22.5 گرم در یک لیتر
pH نهایی در دمای 25 درجه سانتیگراد: 7.0 ± 0.2
غلظت محیط آمادهشده: 2.25 درصد.
📊 کاربرد محیط کشت پلیت کانت آگار
| کاربرد | گروه هدف | نوع نمونه | هدف استفاده |
|---|---|---|---|
| شمارش کل باکتریهای هوازی | باکتریهای قابل رشد در شرایط آزمون | مواد غذایی | برآورد بار میکروبی کل |
| شمارش میکروبی شیر | فلور باکتریایی شیر | شیر خام و فرآوردههای لبنی | کنترل کیفیت میکروبی |
| شمارش استاندارد پلیت | باکتریهای مزوفیل | غذا، آب و نمونههای صنعتی | محاسبه CFU |
| کنترل کیفیت آب | باکتریهای هتروتروف | آب آشامیدنی و صنعتی | بررسی بار میکروبی |
| کنترل کیفیت مواد غذایی | میکروارگانیسمهای هوازی | مواد اولیه و محصول نهایی | بررسی کیفیت و ماندگاری |
| بررسی خوراک دام | باکتریهای قابل کشت | خوراک دام و طیور | ارزیابی آلودگی میکروبی |
| پایش فرایند تولید | فلور عمومی میکروبی | سطوح، تجهیزات و نمونههای فرایندی | کنترل آلودگی |
| تحقیقات میکروبیولوژی | باکتریهای غیرسخترشد | نمونههای تحقیقاتی | شمارش و مقایسه بار میکروبی |
| شمارش به روش Pour Plate | کلنیهای سطحی و عمقی | رقتهای نمونه | شمارش کلنیهای رشدکرده در آگار |
⚙️ اساس عملکرد محیط کشت PCA
محیط Plate Count Agar یک محیط غیرانتخابی است که مواد مغذی پایه مورد نیاز برای رشد طیف وسیعی از باکتریهای قابل کشت را فراهم میکند.
هضم پانکراسی کازئین منبع اصلی نیتروژن، پپتیدها و اسیدهای آمینه است و رشد سلولی باکتریها را پشتیبانی میکند.
عصاره مخمر ویتامینها، مواد معدنی و فاکتورهای رشد مورد نیاز میکروارگانیسمها را تأمین میکند.
گلوکز بهعنوان منبع کربن و انرژی در متابولیسم باکتریها مصرف میشود.
آگار بستر جامدی برای تشکیل کلنیهای مجزا ایجاد میکند و امکان شمارش تعداد کلنیهای رشدکرده را فراهم میسازد.
در این محیط، هر سلول زنده یا مجموعهای از سلولها که قادر به رشد باشد میتواند یک کلنی ایجاد کند. نتیجه معمولاً بهصورت CFU/g، CFU/ml یا CFU/cm² گزارش میشود.
PCA فاقد ترکیبات انتخابی و افتراقی است؛ بنابراین تعداد کلنیها نشاندهنده بار میکروبی قابل کشت در شرایط آزمون است، نه تعداد مطلق تمام میکروارگانیسمهای موجود در نمونه.
🧫 طریقه آمادهسازی محیط کشت پلیت کانت آگار ایبرسکو
برای تهیه یک لیتر محیط:
پیش از مصرف، ظرف حاوی پودر را بهآرامی تکان دهید تا ترکیبات آن یکنواخت شوند.
مقدار 22.5 گرم از پودر Plate Count Agar ایبرسکو را وزن کنید.
پودر را در یک لیتر آب مقطر سرد سوسپانسیون کنید.
چند دقیقه زمان دهید تا پودر بهطور کامل با آب تماس پیدا کند.
محیط را همراه با همزدن بهآرامی حرارت دهید تا پودر و آگار کاملاً حل شوند.
محیط را در دمای 121 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه اتوکلاو کنید.
پس از استریلیزاسیون، محیط را برای روش Pour Plate تا حدود 44 تا 47 درجه سانتیگراد خنک کنید.
حجم مشخصی از رقت نمونه را در پلیت استریل وارد کنید.
مقدار مناسب محیط مذاب را به پلیت اضافه کنید.
پلیت را بهآرامی با حرکت دورانی مخلوط کنید تا نمونه بهطور یکنواخت در محیط پخش شود.
اجازه دهید محیط کاملاً جامد شود.
پلیتها را بر اساس استاندارد و نوع نمونه در شرایط مناسب انکوبه کنید.
🧮 روش شمارش بهوسیله Plate Count Agar
روش Pour Plate
در روش Pour Plate، معمولاً حجم مشخصی از نمونه یا رقت آن داخل پلیت استریل ریخته میشود و سپس محیط PCA مذاب و خنکشده به آن اضافه میگردد.
پس از جامدشدن محیط، کلنیها ممکن است هم در سطح و هم در عمق آگار رشد کنند.
روش محاسبه
نتیجه کلی شمارش با توجه به تعداد کلنیها، حجم کشتشده و ضریب رقت محاسبه میشود:
CFU/ml = تعداد کلنی × معکوس ضریب رقت ÷ حجم کشتشده
برای نمونههای جامد، نتیجه معمولاً بهصورت CFU/g و برای نمونههای مایع بهصورت CFU/ml گزارش میشود.
دامنه قابل قبول تعداد کلنی باید مطابق استاندارد مورد استفاده تعیین شود. در بسیاری از روشها پلیتهای دارای تعداد کلنی مناسب برای شمارش انتخاب میشوند و پلیتهای بسیار پرتراکم بهصورت TNTC گزارش میشوند.
⚠️ نکات مهم در آمادهسازی و استفاده از محیط PCA
✓ مقدار صحیح پودر برای این کد بر اساس دیتاشیت رسمی، 22.5 گرم در یک لیتر است.
✓ محیط مذاب پیش از تماس با نمونه باید تا دمای مناسب خنک شود.
✓ دمای بیشازحد محیط هنگام Pour Plate میتواند باعث آسیب حرارتی به میکروارگانیسمها و کاهش شمارش شود.
✓ محیط نباید آنقدر سرد شود که پیش از توزیع شروع به جامدشدن کند.
✓ نمونه و محیط باید با حرکات ملایم و یکنواخت مخلوط شوند.
✓ از ایجاد حباب در محیط جلوگیری شود؛ حباب ممکن است با کلنی اشتباه گرفته شود.
✓ زمان بین افزودن نمونه و محیط باید کوتاه و یکنواخت باشد.
✓ برای نمونههای آلوده، تهیه رقتهای سریالی مناسب ضروری است.
✓ پلیتهای دارای رشد بیشازحد متراکم برای شمارش دقیق مناسب نیستند.
✓ شرایط انکوباسیون باید بر اساس نوع نمونه و استاندارد مربوطه انتخاب شود.
✓ کلنیهای عمقی معمولاً کوچکتر و فشردهتر از کلنیهای سطحی دیده میشوند.
✓ PCA برای شناسایی گونهها طراحی نشده و در صورت نیاز، کلنیها باید به محیطهای افتراقی یا آزمونهای تکمیلی منتقل شوند.
🔬 شرایط انکوباسیون محیط Plate Count Agar
شرایط انکوباسیون بسته به استاندارد، نوع نمونه و گروه میکروبی مورد نظر متفاوت است.
| کاربرد | دمای رایج | مدت تقریبی |
|---|---|---|
| کنترل کیفیت رسمی ایبرسکو | 35 ± 2°C | 18 تا 48 ساعت |
| شمارش باکتریهای مزوفیل مواد غذایی | حدود 30 تا 35 درجه سانتیگراد | 24 تا 72 ساعت |
| استاندارد ISO 4833 | معمولاً حدود 30 درجه سانتیگراد | بر اساس روش استاندارد |
| شمارش باکتریهای رواندوست | دمای پایینتر | مدت طولانیتر |
| شمارش آب و نمونههای محیطی | بر اساس استاندارد مربوطه | متغیر |
کنترل کیفی رسمی محصول ایبرسکو با روش Pour Plate و انکوباسیون در دمای 35 ± 2°C به مدت 18 تا 48 ساعت انجام میشود.
🧬 کنترل کیفیت محیط کشت Plate Count Agar ایبرسکو
بر اساس دیتاشیت و گواهی آنالیز ایبرسکو، محیط با تلقیح حدود 30 تا 300 CFU و به روش Pour Plate ارزیابی میشود.
| سویه کنترل کیفی | شماره ATCC | مقدار تلقیح | نتیجه مورد انتظار |
|---|---|---|---|
| Lactobacillus johnsonii | ATCC 11506 | 30 تا 300 CFU | بازیابی خوب |
| Staphylococcus aureus | ATCC 25923 | 30 تا 300 CFU | بازیابی خوب |
علاوه بر بازیابی سویههای مرجع، استریلیتی، pH، رنگ، ظاهر، حلالیت و قدرت ژل محیط نیز باید بررسی شوند.
👁️ ظاهر محیط کشت
ظاهر پودر دهیدراته: پودر بژ روشن، همگن و روان.
ظاهر محیط آمادهشده: محیط کهربایی روشن و کمی اپالسانس.
غلظت محلول آمادهشده: 2.25 درصد.
pH در دمای 25 درجه سانتیگراد: 7.0 ± 0.2
🌡️ شرایط نگهداری
پودر دهیدراته Plate Count Agar ایبرسکو باید در ظرف اصلی، کاملاً دربسته و در محیط خشک در محدوده دمایی 15 تا 30 درجه سانتیگراد نگهداری شود.
محیط آمادهشده باید در دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد نگهداری شود.
پس از هر بار مصرف، درب ظرف باید بلافاصله بسته شود تا از جذب رطوبت و افت کیفیت جلوگیری شود.
از محیط آمادهای که دچار آلودگی، خشکشدن، ترکخوردگی، رسوب غیرعادی یا تغییر رنگ شده است استفاده نشود.
📊 مقایسه PCA با محیطهای کشت مشابه
| ویژگی | Plate Count Agar | Nutrient Agar | Tryptic Soy Agar | R2A Agar |
|---|---|---|---|---|
| نام اختصاری | PCA | NA | TSA | R2A |
| کاربرد اصلی | شمارش بار میکروبی | کشت عمومی و نگهداری سویه | کشت عمومی و کنترل کیفیت | شمارش باکتریهای آب با رشد آهسته |
| نوع محیط | عمومی و غیرانتخابی | عمومی و غیرانتخابی | عمومی و غنی | کممواد مغذی |
| مناسب برای Pour Plate | بسیار مناسب | قابل استفاده، اما کاربرد اصلی نیست | قابل استفاده | معمولاً روشهای اختصاصی آب |
| مناسب شمارش مواد غذایی | کاربرد اصلی | محدودتر | در برخی روشها | خیر |
| مناسب کشت روتین سویه | قابل استفاده | بسیار مناسب | بسیار مناسب | محدود |
| قدرت تغذیهای | متوسط و کنترلشده | متوسط | بالا | پایین |
| مناسب باکتریهای آسیبدیده آب | محدود | محدود | محدود | مناسبتر |
| دارای شاخص افتراقی | خیر | خیر | خیر | خیر |
| کاربرد شاخص | Standard Plate Count | کشت عمومی ساده | بازیابی گسترده باکتریها | شمارش فلور آب |
❓ سوالات متداول محیط کشت پلیت کانت آگار
محیط کشت PCA چیست؟
Plate Count Agar یک محیط کشت عمومی و غیرانتخابی است که برای شمارش باکتریهای زنده و قابل کشت در مواد غذایی، شیر، آب، خوراک دام و سایر نمونهها استفاده میشود.
محیط کشت پلیت کانت آگار چه کاربردی دارد؟
این محیط برای شمارش کل باکتریهای هوازی، تعیین بار میکروبی مواد غذایی و لبنی، کنترل کیفیت آب و انجام Standard Plate Count کاربرد دارد.
تفاوت PCA و Nutrient Agar چیست؟
PCA بهطور ویژه برای شمارش میکروبی و روش Pour Plate فرمولبندی شده است، درحالیکه Nutrient Agar بیشتر برای کشت عمومی، نگهداری سویهها و بررسی خلوص کشت استفاده میشود.
آیا Plate Count Agar محیط انتخابی است؟
خیر. PCA فاقد مواد مهارکننده و شاخصهای افتراقی است و طیف وسیعی از باکتریهای قابل رشد را پشتیبانی میکند.
چه مقدار پودر PCA ایبرسکو برای یک لیتر لازم است؟
بر اساس دیتاشیت رسمی Plate Count Agar ایبرسکو کد i23144، برای تهیه یک لیتر محیط باید 22.5 گرم پودر در یک لیتر آب مقطر حل و در دمای 121 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه اتوکلاو شود.
چرا دمای محیط مذاب در روش Pour Plate اهمیت دارد؟
اگر محیط بیشازحد داغ باشد، ممکن است بخشی از میکروارگانیسمها آسیب ببینند و شمارش کمتر از مقدار واقعی شود. اگر بیشازحد سرد باشد، محیط پیش از مخلوطشدن کامل جامد خواهد شد.
CFU چیست؟
CFU مخفف Colony Forming Unit است و تعداد سلولها یا مجموعههای سلولی زندهای را نشان میدهد که قادر به تشکیل کلنی در شرایط آزمون هستند.
آیا PCA برای شناسایی نوع باکتری مناسب است؟
خیر. این محیط برای شمارش طراحی شده است. شناسایی گونه یا گروه میکروبی نیازمند کشت مجدد روی محیطهای اختصاصی و انجام آزمونهای تکمیلی است.
محیط کشت پلیت کانت آگار ایبرسکو را از کجا تهیه کنیم؟
برای خرید محیط کشت پلیت کانت آگار ایبرسکو کد i23144، استعلام قیمت PCA و تهیه سایر محیطهای کشت شمارش میکروبی میتوانید از طریق فرازمد اقدام کنید.
